Рутина Уэсли родилась 1 февраля 1979 года в американском городе Лас-Вегас. Рутина дочь профессионального танцора Айвери Уилер и его супруги Кассандры Уэсли.

С ранних лет Рутина занималась танцами в центре искусств «Simba Studios and the West Las Vegas».

Училась Рутина Уэсли в средней школе при Академии искусств Лас-Вегаса, окончив которую в 1997 году она поступила в Университет Эвансвилл, где в 2001 году получила степень бакалавра в области сценического искусства.

В том же 2001 году Рутина поступила в Джульярдскую школу, которую она окончила в мае 2005 года. Лето после учебы Рутина провела в Королевской академии драматического искусства в Лондоне, где детально изучала творчество Шекспира.

Во время учебы в Джульярдской школы Рутина Уэсли принимала участие в классических театральных постановках, таких как «Макбет», «Женитьба Фигаро», а также «Ромео и Джульетта», где она исполнила главную роль.

В 2004 году Рутина приняла участие в съемках комедийной драмы «Правила съема: Метод Хитча» (2005), однако, после редактирования все сцены с ней были вырезаны.

Состоялся актерский дебют Рутины на киноэкранах лишь в 2007 году, она исполнила роль танцовщицы Райи Грин в драме «Как она двигается». До этого актриса играла в театральных постановках «The Vertical Hour» (2006), на Бродвее, и «In Darfur» (2007), на сцене The Public Theater в Нью-Йорке.

В 2008 году Уэсли начала исполнять роль Тары Торнтон в сериале «Настоящая кровь» (2008-2014), которая в итоге принесла ей мировую известность.

В 2011 году она появилась в телекартине «Top 100 Number Ones», а в 2012 году исполнила главную роль в драме «California Winter».

В 2013 году Рутина вместе с Марком Веббером и Роном Перлманом снялась в триллере «13 грехов».

В том же 2013 году Рутина Уэсли приступила к съемкам в драме «Последний уик-энд», выход которой состоялся в мае 2014 года.