Дженнифер Джоанна Энистон родилась 11 февраля 1969 года в небольшом американском городке Шерман-Окс, в актёрской семье Джона Энистона (настоящее имя Иоаннис Анастассакис) и его супруги Нэнси Доу. Кроме Дженнифер в семье также выросли два сына - старший Джон и младший Алекс.

Спустя 9 лет после рождения Дженнифер, Джон и Нэнси развелись. С того времени Энистон воспитывалась матерью, вместе с которой она переехала в Нью-Йорк.

Училась Дженнифер в средней школе Рудольфа Штайнера, где в возрасте 11 лет стала посещать школьный драмкружок. В возрасте 14 лет она прошла собеседование и была зачислена в нью-йоркскую школу исполнительского мастерства, после окончания которой Энистон пошла на курсы психологии, но параллельно с ними играла на Бродвее.

В то же время Дженнифер, имея финансовые проблемы, подрабатывала официанткой в закусочной, а также курьером.

В 1990 году Энистон переехала в Лос-Анджелес, чтобы начать карьеру киноактрисы. В том же году она исполнила свои первые роли на телевидении, снявшись в телевизионных шоу «Camp Cucamonga», «Molloy» и «Ferris Bueller».

Следующую роль Дженнифер получила в 1992 году, ей досталась роль в одном из эпизодов популярного сериала «Квантовый скачок», а также небольшая роль в сериале «Голова Германа».

В 1993 году состоялся дебют Дженнифер Энистон на большом экране, она исполнила главную роль в фильме ужасов «Лепрекон», который не смотря на плохие отзывы критиков стал коммерчески успешным, заработав около $8,5 млн в прокате.

В 1994 году ей достались небольшие роль в сериалах «Выкарабкивающийся» и «Правосудие Берка», а также роль Рейчел Грин в «Друзья». Благодаря сериалу «Друзья», который шел на протяжении 10 лет, Дженнифер, а также другие исполнители главных ролей - Кортни Кокс, Мэттью Перри, Лиза Кудроу, Мэтт Леблан и Дэвид Швиммер, получили всемирную известность. За участие в этом шоу актриса была пять раз номинирована на «Эмми» (и победила один раз) в номинации «Лучшая женская роль в комедийном сериале».

Параллельно со съемками в «Друзьях» Дженнифер также снималась и в полнометражных фильмах, так в 1996 году она появился в главной роли в драме «Принц из снов», в 1997 году в «Портрете совершенства», в 1998 году в «Объекте моего восхищения» и «Тонкой розовой линии», а в 1999 году в комедии «Офисное пространство».

В том же 1999 году Дженнифер Энистон принимала участие в озвучке мультфильма «Стальной гигант».

В 2001 году Энистон появилась в главной роли в музыкальной комедии «Рок-звезда», где снялась вместе с Марком Уолбергом, а также в драме «Хорошая девочка», где ее партнером по площадке стал Джейк Джилленхол. За роль в последней Дженнифер получила очень тёплые отзывы кинокритиков и несколько номинаций на американских кинофестивалях.

Среди других профессиональных экспериментов Дженнифер Энистон можно упомянуть опыт съёмок в компьютерной игре «Режиссёрское кресло Стивена Спилберга» 1995 года, в которой партнёром Дженифер был Квентин Тарантино.

В 2002 году Энистон составила компанию Джиму Керри на съемках комедии «Брюс всемогущий», премьера которой состоялась весной 2003 года. Картина стала коммерчески успешной и собрала в прокате около 500 миллионов долларов, что в пять раз больше чем на нее потратили при создании.

В 2004 году с участием Дженнифер вышла картина «А вот и Полли!», где вместе с ней также снялись Бен Стиллер и Филип Сеймур Хоффман. Картина также имела хороший коммерческий успех, собрав в мировом прокате свыше $170 млн.

В 2005 году Энистон снялась в драматическом триллере «Цена измены», в котором её партнёром стал Клайв Оуэн, и романтической мелодраме «Ходят слухи», продолжении популярного в США фильма «Выпускник». Достаточно успешными оказались и последующие фильмы с Энистон: «Положись на друзей» (2006), «Развод по-американски» (2006), «Марли и я» (2008), «Обещать – не значит жениться» (2008) и «Любовь случается» (2009).

В 2006 году Дженнифер Энистон дебютировала как режиссер, сняв короткометражный фильм «Комната 10».

В 2010 году на экраны вышла комедия с Дженнифер Энистон и Джерардом Батлером в главных ролях – «Охотник за головами». Фильм был тепло принят зрителями и заработал в мировом прокате почти 140 миллионов долларов (при бюджете в 40 миллионов). В августе 2010 года на российских экранах появится новая картина с Энистон «Больше, чем друг».

К июню 2010, фильмы с участием Дженнифер собрали свыше 1 млрд долларов в США, и около 1,7 млрд по всему миру.

11 февраля 2011 года с участием Дженнифер состоялась премьера романтической комедии «Притворись моей женой». По сюжету этого фильма, успешный пластический хирург (Адам Сэндлер) просит свою секретаршу (Энистон) притвориться его женой, чтобы он смог доказать свою честность своей подружке (Бруклин Декер).

22 февраля 2012 года Дженнифер удостоилась персональной звезды на «Аллее славы» в Голливуде.

Также в феврале 2012 года состоялась премьера фильма «Жажда странствий», в котором Дженнифер снялась вместе с Полом Раддом, Джастином Теру и Малин Акерман.

В августе 2013 года на большие экраны вышел фильм «Мы – Миллеры», главную роль в котором исполнила Энистон. Также в главных ролях снялись Джейсон Судейкис, Эмма Робертс и Уилл Поултер.

15 сентября 2013 года в рамках Международного кинофестиваля в Торонто состоялась премьера криминальной комедии «Подмена». Партнёрами Дженнифер в картине выступили Айла Фишер и Тим Роббинс.

В 2014 году Дженнифер исполнила главную роль в драме «Торт», а также появилась в роли Джулии Харрис в комедии «Несносные боссы 2».

Дженнифер Энистон неоднократно попадала в списки «Самых красивых людей» журналов People, FHM и Maxim.